三七皂苷柱色谱，柱色谱法在洗脱和分离过程中应注意什么

发布时间：2023-06-15 04:36 编辑：网络点击：97

本文目录一览柱色谱法在洗脱和分离过程中应注意什么2，三七总皂苷液相色谱出峰顺序3，皂苷如何分离4，三七皂苷R1的三七皂苷R15，柱色谱法对吸附剂的要求是什么6，三七皂苷是一种口服药物最好使用什么来提取7，为什么避免使流动相液面低于色谱柱……

本文目录一览

1，柱色谱法在洗脱和分离过程中应注意什么
2，三七总皂苷液相色谱出峰顺序
3，皂苷如何分离
4，三七皂苷R1的三七皂苷R1
5，柱色谱法对吸附剂的要求是什么
6，三七皂苷是一种口服药物最好使用什么来提取
7，为什么避免使流动相液面低于色谱柱中吸附剂的上端
8，有关滴柱柱色谱的一些情况
9，柱色谱如何选择展开剂

1，柱色谱法在洗脱和分离过程中应注意什么

洗脱前首先要用特定的溶液清洗吸附剂，然后在分离过程中调整料液压力和料液速率，最后再选择合适的洗脱液……你可以问的再具体点

三七皂苷柱色谱

2，三七总皂苷液相色谱出峰顺序

反相液相色谱法中,物质极性强的先出峰,极性弱的后出峰,在正相色谱中相反,物质极性强的后出峰,极性弱的先出峰。当然这个不是完全固定的。具体的看你的实验方法,看固定相和流动相。一般反相色谱是极性大的先出峰,极性小的后出峰。不过如果流动相中有酸碱性就不一定了。比如流动相是弱酸性的,那么样品中的碱性物质会提前出峰。

三七皂苷柱色谱

3，皂苷如何分离

谢谢epon的及时回复，能不能氯仿甲醇的含水量说得更详细些。我这有张TLC照片，展开剂是氯仿-甲醇-水（13：7：2）的下层,你看柱色谱的洗脱剂如何安排比较合适呢？可惜粘贴不上照片

我做的时候用80%乙醇提取，大孔树脂以乙醇30，50，70，90%洗脱，取50%和70%的硅胶柱层析，氯仿-甲醇-水梯度洗脱，具体梯度要看你的薄层情况，先要用氯仿-甲醇-水做TLC，查看不同梯度各个点的情况，再利用这个条件跑柱。之后可以配合制备HPLC。

三七皂苷柱色谱

4，三七皂苷R1的三七皂苷R1

（Notoginsenoside R1）【产品名称】三七皂苷R1 【英文名称】Notoginsenoside R1【别名】【分子式】C47H80O18 【分子量】933.131【C A S 号】80418-24-2【化学分类】Saponins皂苷类【来源】Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen【规格】>95% >98%【性状】white powder 别名：开化三七、人参三七、田七、金不换、盘龙七来源：三七Panax notoginseng( Burk.)F.H.Chen的干燥根及根茎【药材提取和对照品溶液的配制】药材的提取：精密称取本品粉末（过四号筛）0.5678g，精密加入甲醇50ml，称定重量，放置过夜，置80℃水浴上保持微沸2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得。对照品溶液的制备：分别精密称取人参皂苷Rgl对照品、人参皂苷Rbl对照品和三七皂苷R1对照品14.7mg，13.2mg和8.0mg，置10ml容量瓶中加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取以上三种对照品加流动相制成每1ml含人参皂苷Rg1 0.18mg，人参皂苷Rb1 0.16mg、三七皂苷R1 0.10mg的混合溶液即得。色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18150 x 4.6mm, 5ym进样量：20yl检测波长：203nm柱温：25.0℃流动相：0--12mm 乙腈：水=19：81，12—60min乙腈：水=（19一36）：（81～64）方法来源：《中国药典》 2005版对照品含量：人参皂苷Rg1 99.0%、人参皂苷Rb1 99.4%、三七皂苷R1 99.0%仪器；Agilent 1200配置：四元梯度泵（带真空脱气），DAD检测器，柱温箱，自动进样器。外标法计算对照药材中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1总含量为9-31%，分别以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1为对象，拖尾因子为：0.98、1.07和0.98，柱理论塔板数分别为：3321、3840、2987。

5，柱色谱法对吸附剂的要求是什么

⑴对样品组分和洗脱剂都不会发生任何化学反应，在洗脱剂中也不会溶解。 ⑵对待分离组分能够进行可逆的吸附，同时具有足够的吸附力，使组分在固定相与流动相之间能最快地达到平衡。 ⑶颗粒形状均匀，大小适当，以保证洗脱剂能够以一定的流速（一般为1.5 mL·min-1）通过色谱柱。 ⑷材料易得，价格便宜而且是无色的，以便于观察。可用于吸附剂的物质有氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙（镁）、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。其中有些对几类物质分离效果较好，而对其它大多数化合物不适用。

6，三七皂苷是一种口服药物最好使用什么来提取

冻死

一种从中药三七中提取纯化总皂苷的制备方法，通过将三七药材粉碎成过粉末或颗粒，去除杂质，烘干，用含浓度为0-95％的乙醇水溶媒渗滤，热回流提取，提取液减压浓缩富集，将浓缩液上D101大孔树脂，依次以水、氨水、醇水洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，即得三七总皂苷精制物。本发明的方法制成的三七总皂苷，可制成片剂、胶囊、注射剂等多种药剂学上所说的剂型，也可配合其它药物或组分一起制成制剂使用。本发明方法只需乙醇水溶液提取，使用一次大孔树脂柱分离，终产物三七总皂苷纯度高，产品稳定性和均一性良好。本发明方法设计合理，低成本、易操作、稳定性好、质控更严格、易于产业化生产。

7，为什么避免使流动相液面低于色谱柱中吸附剂的上端

色谱析chromatography基于混合物各组体系两相物理化性能差异（吸附、配差异等）进行离析际公认俄M.C.茨维特色谱创始色谱体系两相作相运通其相固定称固定相；另相移称流相色谱析程物质迁移速度取决于与固定相流相相作用力溶质两相吸引力间作用力包括色散力、诱导效应、场间效应、氢键力路易斯酸碱相互作用于离离间静电吸引力较强吸引固定相溶质相滞于较强吸引流相溶质随着移反复进行与配使混合物各组离色谱析类比较复杂根据流相固定相同色谱气相色谱液相色谱①气相色谱流相气体：气固色谱其流相气体固定相固体；气液色谱其流相气体固定相涂惰性固体液体②液相色谱流相液体?液固色谱其流相液体固定相固体；②液液色谱其流相固定相均液体按吸附剂及其使用形式柱色谱、纸色谱薄层色谱按吸附力吸附色谱、离交换色谱、配色谱凝胶渗透色谱按色谱操作终止展色谱洗脱色谱按进区带色谱、迎色谱顶替色谱经色谱离各组与已知标准品照进行定性析现代化色谱-质谱联用或色谱-光谱联用仪器配备丰富谱图库微处理机色谱柱流组直接送入质谱光谱仪进行定性鉴定数据定量处理发智能化色谱析发展主要向色谱特点?①离效率高离性质十相近物质含百种组复杂混合物进行离②离速度快几钟几十钟能完复杂物质离操作③灵敏度高能检测含量10-12克物质④进行规模纯物质制备色谱化工、石油、物化、医药卫、环境保护、食品检验、医检验、农业等各领域都广泛应用各种色谱气液色谱液固色谱应用广气相色谱离、化合物比较理想等用液液色谱液固色谱离离交换色谱般用于离基团物质尺寸再用凝胶渗透色谱离薄层色谱纸色谱析速度快、便、本低柱色谱比薄层色谱纸色谱具更高辨能力

你说的不是高效液相色谱这种高压色谱吧，如果我理解的没错的话，你指的是那种开放式的色谱柱系统，此种系统，装流动相的容器中如果液面低于色谱柱中填料上端，会造成流动相无法流出的后果。

8，有关滴柱柱色谱的一些情况

柱色谱（柱上层析）常用的有吸附色谱和分配色谱两类。吸附色谱常用氧化铝和硅胶作固定相；而分配色谱中以硅胶、硅藻土和纤维素作为支持剂，以吸收较大量的液体作固定相，而支持剂本身不起分离作用。吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂。当待分离的混合物溶液流过吸附柱时，各种成分同时被吸附在柱的上端。当洗脱剂流下时，由于不同化合物吸附能力不同，往下洗脱的速度也不同，于是形成了不同层次，即溶质在柱中自上而下按对吸附剂的亲和力大小分别形成若干色带，再用溶剂洗脱时，已经分开的溶质可以从柱上分别洗出收集；或将柱吸干，挤出后按色带分割开，再用溶剂将各色带中的溶质萃取出来。实验装置及样品： 1、装置图：（1）吸附剂常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙和活性炭等。吸附剂一般要经过纯化和活性处理，颗粒大小应当均匀。对于吸附剂而言，粒度愈小表面积愈大，吸附能力就愈高，但颗粒愈小时，溶剂的流速就太慢，因此应根据实际分离需要而定。供柱色谱使用的氧化铝有酸性、中性、碱性三种：酸性氧化铝用1%盐酸浸泡后，用蒸馏水洗至氧化铝的悬浮液pH为4，用于分离酸性物质。中性氧化铝其悬浮液的pH为7.5，用于分离中性物质。碱性氧化铝其悬浮液的pH为10，用于胺或其它碱性物质的分离。大多数吸附剂都能强烈地吸水，而且水分易被其它化合物置换，因此吸附剂的活性降低，通常有加热方法使吸附剂活化。氧化铝随着表面含水量的不同，而分成各种活性等级。见P.112表3.7。活性等级的测定一般采用勃劳克曼（Brockmann）标准测定法。（2）溶质的结构与吸附能力的关系化合物的吸附性与它们的极性成正比，化合物分子中含有极性较大的基团时，吸附性也较强，各种化合物对氧化铝的吸附性按以下次序递减：酸和碱 > 醇、胺、硫醇 > 酯、醛、酮 > 芳香族化合物 > 卤代物、醚 >烯 > 饱和烃在本实验中，乙酰二茂铁极性大于二茂铁，因此，二茂铁首先被洗脱下来。（3）溶剂溶剂的选择是重要的一环，通常根据被分离物中各化合物的极性、溶解度和吸附剂的活性等来考虑。先将要分离的样品溶于一定体积的溶剂中，选用的溶剂极性要低，体积要小。如有的样品在极性低的溶剂中溶解度很小，则可加入少量极性较大的溶剂，使溶液体积不致太大。色层的展开首先使用极性较小的溶剂，使最容易脱附的组分分离。然后加入不同比例的极性溶剂配成的洗脱剂，将极性较大的化合物自色谱柱中洗脱下来。常用洗脱剂的极性按如下次序递增：己烷和石油醚 < 环己烷 < 四氯化碳 < 三氯乙烯 < 二硫化碳 < 甲苯 < 苯 < 二氯甲烷 < 氯仿 < 乙醚 < 乙酸乙酯 < 丙酮 < 丙醇 < 乙醇 < 甲醇 < 水 < 吡啶 < 乙酸所用溶剂必须纯粹和干燥，否则会影响吸附剂的活性和分离效果。本实验所用溶剂为石油醚：乙醚＝3：1的混合溶剂（学生自己配制）。吸附剂色谱的分离效果不仅依赖于吸附剂和洗脱剂的选择，而且与制成的色谱柱有关：（1）柱中的吸附剂用量为被分离样品量的30—40倍，若需要可增至100倍；（2）柱高和直径之比一般是75：1；（3）装柱有湿法和干法两种，本实验采用湿法装柱，无论采用哪种方法装柱，都不用使吸附剂有裂缝或气泡。 2、样品：粗制的乙酰二茂铁乙醚溶液

9，柱色谱如何选择展开剂

以下内容会对你有用的选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷<己烷<苯<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇使用单一溶剂，往往不能达到很好的分离效果，往往使用混合溶剂通常使用一个高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂，高极性的溶剂还有增加区分度的作用，常用的溶剂组合有： Petroleumether/Ethylacetate,petroleumether/Acetone,Petroleumether/Ether, Petroleumether/CH2Cl2, ethylacetate/MeOH,CHCl3/ethylacetate 展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂，就首先尝试使用该类展开剂，然后不断尝试比例，直到找到一个分离效果好的展开剂。展开剂的选择条件：①对的所需成分有良好的溶解性；②可使成分间分开；③待测组分的Rf在0.2~0.8之间，定量测定在0.3～0.5之间；④不与待测组分或吸附剂发生化学反应；⑤沸点适中，黏度较小；⑥展开后组分斑点圆且集中；⑦混合溶剂最好用新鲜配制。一般来说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成，再根据需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性，以达到好的分离效果，适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离；中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于蒽醌、香豆素，以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离；强极性溶剂，由正丁醇和水组成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。很多时候,展开剂的选择要靠自己不断变换展开剂的组成来达到最佳效果。我们在实验中，为了实现一个配体与其他杂质有效分离，曾经尝试了很多种的溶剂组合，最后才找到石油醚—EtOAc—HCOOH（5.5：3.5：0.1）混合溶剂。一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹象,再调整比例（或者加入第三种溶剂）,达到最佳效果；如果没有分开的迹象（斑点较“拖”），最好是换溶剂。对于在硅胶中这种酸性物质上易分解的物质，在展开剂里往往加一点点三乙胺，氨水，吡啶等碱性物质来中和硅胶的酸性。（选择所添加的碱性物质，还必须考虑容易从产品中除去，氨水无疑是较好的选择。）分离效果的好坏和所用硅胶和溶剂的质量很有关系：不同厂家生产的硅胶可能含水量以及颗粒的粗细程度，酸性强弱不同，从而导致产品在某个厂家的硅胶中分离效果很好，但在另一个厂家的就不行。溶剂的含水量和杂质含量对分离效果都有明显的影响。温度，湿度对分离效果影响也很明显，在实验中我们发现有时同一展开条件，上下午的Rf截然不同展开剂的选择主要根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等因素来考虑在进行薄层层析时，首先应该知道未知化学成分的类型，其极性的大致归属，从提取液或从色谱柱的流动相极性可知，另外某样品里含多种化学成分先按极性不同大致分，然后细分，对于分离未知的化学物质，展开剂的选择也是一个摸索的过程，不应该仅仅从展开剂考虑，多因素综合衡量！溶剂：层析过程中溶剂的选择，对组分分离关系极大。在柱层析时所用的溶剂（单一剂或混合溶剂）习惯上称洗脱剂，用于薄层或纸层析时常称展开剂。洗脱剂的选择，须根据被分离物质与所选用的吸附剂性质这两者结合起来加以考虑在用极性吸附剂进行层析时，当被分离物质为弱极性物质，一般选用弱极性溶剂为洗脱剂；被分离物质为强极性成分，则须选用极性溶剂为洗脱剂。如果对某一极性物质用吸附性较弱的吸附剂（如以硅藻土或滑石粉代替硅胶），则洗脱剂的极性亦须相应降低。在柱层操作时，被分离样品在加样时可采用于法，亦可选一适宜的溶剂将样品溶解后加入。溶解样品的溶剂应选择极性较小的，以便被分离的成分可以被吸附。然后渐增大溶剂的极性。这种极性的增大是一个十分缓慢的过程，称为“梯度洗脱”，使吸附在层析柱上的各个成分逐个被洗脱。如果极性增大过诀（梯度太大），就不能获得满意的分离。溶剂的洗脱能力，有时可以用溶剂的介电常数（ε）来表示。介电常数高，洗脱能力就大。以上的洗脱顺序仅适用于极性吸附剂，如硅胶、氧化铝。对非极性吸附剂，如活性炭，则正好与上述顺序相反，在水或亲水住溶剂中所形成的吸附作用，较在脂溶性溶剂中为强。 3．被分离物质的性质：被分离的物质与吸附剂，洗脱剂共同构成吸附层析中的三个要素，彼此紧密相连。在指定的吸附剂与洗脱剂的条件下，各个成分的分离情况，直接与被分离物质的结构与性质有关。对极性吸附剂而言，成分的极性大，吸附住强。当然，中草药成分的整体分子观是重要的，例如极性基团的数目愈多，被吸附的住能就会更大些，在同系物中碳原子数目少些，被吸附也会强些。总之，只要两个成分在结构上存在差别，就有可能分离，关键在于条件的选择。要根据被分离物质的性质，吸附剂的吸附强度，与溶剂的性质这三者的相互关系来考虑。首先要考虑被分离物质的极性。如被分离物质极性很小为不含氧的萜烯，或虽含氧但非极性基团，则需选用吸附性较强的吸附剂，并用弱极性溶剂如石油醚或苯进行洗脱。但多数中药成分的极性较大，则需要选择吸附性能较弱的吸附剂（一般Ⅲ～Ⅳ级）。采用的洗脱剂极性应由小到大按某一梯度递增，或可应用薄层层析以判断被分离物在某种溶剂系统中的分离情况。此外，能否获得满意的分离，还与选择的溶剂梯度有很大关系。现以实例说明吸附层析中吸附剂、洗脱剂与样品极性之间的关系。如有多组分的混合物，象植物油脂系由烷烃、烯烃、舀醇酯类、甘油三酸醋和脂肪酸等组份。当以硅胶为吸附剂时，使油脂被吸附后选用一系列混合溶剂进行洗脱，油脂中各单一成分即可按其极性大小的不同依次被洗脱。又如对于C-27甾体皂甙元类成分，能因其分字中羟基数目的多少而获得分离：将混合皂甙元溶于含有5％氯仿的苯中，加于氧化铝的吸附柱上，采用以下的溶剂进行梯度洗脱。如改用吸附性较弱的硅酸镁以替代氧化铝，由于硅酸镁的吸附性较弱，洗脱剂的极牲需相应降低，亦即采用苯或含5％氯仿的苯，即可将一元羟基皂甙元从吸附剂上洗脱下来。这一例子说明，同样的中草药成分在不同的吸附剂中层析时，需用不同的溶剂才能达到相同的分离效果，从而说明吸附剂、溶剂和欲分离成分三者的相互关系。 realtiger 2006-10-15 18:38:00 （续）（二）簿层层析：薄层层析是一种简便、快速、微量的层析方法。一般将柱层析用的吸附剂撒布到平面如玻璃片上，形成一薄层进行层析时一即称薄层层析。其原理与柱层析基本相似。 1．薄层层析的特点：薄层层析在应用与操作方面的特点与柱层析的比较。 2．吸附剂的选择：薄层层析用的吸附剂与其选择原则和柱层析相同。主要区别在于薄层层析要求吸附剂（支持剂）的粒度更细，一般应小于250目，并要求粒度均匀。用于薄层层析的吸附剂或预制薄层一般活度不宜过高，以Ⅱ～Ⅲ级为宜。而展开距离则随薄层的粒度粗细而定，薄层粒度越细，展开距离相应缩短，一般不超过10厘米，否则可引起色谱扩散影响分离效果。 3．展开剂的选择：薄层层析，当吸附剂活度为一定值时（如Ⅱ或Ⅲ级），对多组分的样品能否获得满意的分离，决定于展开剂的选择。中草药化学成分在脂溶性成分中，大致可按其极性不同而分为无极性、弱极性、中极性与强极性。显色剂：碘：适用于不饱和或者芳香族化合物配制方法：在100ml 广口瓶中，放入一张滤纸，少许碘粒。或者在瓶中，加入10g 碘粒，30g 硅胶高锰酸钾适用于含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛配制方法：1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3 个月磷钼酸(PMA) 广谱配制方法：10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇紫外灯适用于含共轭基团的化合物，芳香化合物硫酸铈：生物碱配制方法：10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁苯酚类化合物配制方法：1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液. 桑色素(羟基黄酮) 广谱, 有荧光活性配制方法：0.1% 桑色素+甲醇茚三酮适用于氨基酸配制方法：1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸二硝基苯肼(DNP) 适用于醛和酮配制方法：12g 二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL 乙醇香草醛(香兰素) 广谱配制方法：15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸溴甲酚绿适用于羧酸，pKa<=5.0 配制方法：在100ml 乙醇中，加入0.04g 溴甲酚绿，缓慢滴加0.1M的NaOH 水溶液，刚好出现蓝色即至。钼酸铈广谱配制方法：235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL 浓硫酸茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1 广谱配制方法：135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL 茴香醛，剧烈搅拌，使混合均匀. 茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2 适用于萜烯，桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine) 配制方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)经常需要利用溶剂的极性大小，对展开剂的极性予以调整

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氧化铝纯化三七皂苷，氧化铝一般含有哪些杂质如何提纯 2023-06-15 04:36 下一篇