三七柄铜，柄铜有毒吗
发布时间：2022-05-31 09:21
编辑：网络
点击：128
柄铜有毒吗丙酮是毒性蛮强的化学物质，而且可由皮肤或呼吸道被吸收。丙酮可经呼吸道、消化道和皮肤吸收。经皮肤吸收缓慢，量少，主要是驼过前两个途径。由于丙酮的水溶性强，它易溶解和吸收入血液中，很快分布于全身。丙酮属微毒类，其毒性主要是对中枢神……
1，柄铜有毒吗
丙酮是毒性蛮强的化学物质，而且可由皮肤或呼吸道被吸收。
丙酮可经呼吸道、消化道和皮肤吸收。经皮肤吸收缓慢，量少，主要是驼过前两个途径。由于丙酮的水溶性强，它易溶解和吸收入血液中，很快分布于全身。丙酮属微毒类，其毒性主要是对中枢神经系统的麻醉作用。基蒸气对粘膜有中等程度的刺激作用。丙酮对皮肤无致敏作用，但有轻度刺激作用。
吸信蒸气急性中毒后主要表现为不同程度的麻醉状态。最初出现管乏力、恶心、头痛、头晕、容易激动。严重时可出现呕吐、气急、痉挛以及昏迷。液体能刺激眼睛。吞服反能刺激消化系统，产生麻醉与错迷等症状
2，请问CuZn37黄铜是什么材料
CuZn37由63%的铜和37%的锌组成。该产品具有与铜相当的良好机械性能和腐蚀行为。低电导率和出色的抗弯曲性能使其成为加热应用的首选。此外，黄铜裸线适用于材料的放电去除(电火花腐蚀)。铜锌合金线有各种绝缘和自粘合漆包线以及裸线或李兹线。特征非常好的机械性能卓越的抗弯曲性能低电导率应用程序电阻丝供暖应用电火花腐蚀吉他琴弦装饰/织物其他人CuZn37黄铜材料名称：铜锌合金(黄铜)牌号：CuZn37代号：2.0321标准：DIN 17660-1974●CuZn37化学成分：铜 Cu：62.0~64.0锌 Zn：余量铅 Pb：≤0.1铝 Al：≤0.03铁 Fe：≤0.1锰 Mn：≤0.1镍 Ni：≤0.3锑 Sb：≤0.01锡 Sn：≤0.1杂质总和(除Ni、Pb外)：≤0.5
3，CuZn37是什么材料
CuZn37是由63%的铜和37%的锌组成的铜锌合金，即平时说的黄铜中的一种，很多人认为CuZn37的成分是铜锌三七开，其实是误解。cuzn37黄铜材料名称：铜锌合金(黄铜)
牌号：cuzn37
代号：2.0321
标准：din 17660-1974
●cuzn37化学成分：
铜 cu：62.0~64.0
锌 zn：余量
铅 pb：≤0.1
铝 al：≤0.03
铁 fe：≤0.1
锰 mn：≤0.1
镍 ni：≤0.3
锑 sb：≤0.01
锡 sn：≤0.1
杂质总和(除ni、pb外)：≤0.5
注：din 17660已于1983年修订过，编号为din 17660-1983，因尚未搜集到，故仍按din 17660-1974给出加工黄铜化学成分。
4，丙酮氢醇属于几类危化品
【丙酮氰醇】是【剧毒品】，是【第六类危化品】。【危化品分类】第一类：爆炸品，爆炸品指在外界作用下(如受热、摩擦、撞击等)能发生剧烈的化学反应，瞬间产生大量的气体和热量，使周围的压力急剧上升，发生爆炸，对周围环境、设备、人员造成破坏和伤害的物品。第二类：压缩气体和液化气体，指压缩的、液化的或加压溶解的气体。这类物品当受热、撞击或强烈震动时，容器内压力急剧增大，致使容器破裂，物质泄漏、爆炸等第三类：易燃液体，本类物质在常温下易挥发，其蒸气与空气混合能形成爆炸性混合物。第四类：易燃固体、自燃物品和遇湿易燃物品，这类物品易于引起火灾。第五类：氧化剂和有机过氧化物，这类物品具有强氧化性，易引起燃烧、爆炸。第六类：毒害品，指进入人(动物)肌体后，累积达到一定的量能与体液和组织发生生物化学作用或生物物理作用，扰乱或破坏肌体的正常生理功能，引起暂时或持久性的病理改变，甚至危及生命的物品。如各种氰化物、砷化物、化学农药等等。第七类：放射性物品，它属于危险化学品，但不属于《危险化学品安全管理条例》的管理范围，国家还另外有专门的“条例”来管理。第八类：腐蚀品，指能灼伤人体组织并对金属等物品造成损伤的固体或液体。
5，三七铜皮铁骨狮子头是什么意思
你好~铜皮是指颜色，铁骨是：你敲击三七这个药材在地面或桌上，发出的音质就和金属铁器一样，狮子头是指三七表面的状突起铜皮：灰黄色的外皮铁骨：质地坚硬难折断狮子头：表面瘤状凸起骨肉分离：切片时皮部与木部易分离三七铜皮铁骨狮子头是指三七的外形，铜皮是指三七的颜色像铜的颜色，铁骨是指敲击三七在地面或桌上，发出的音质就和金属铁器一样，狮子头是指三七表面的形状突起。三七的特征可用“乳包、钉头、铜皮、铁骨、菊花心”概括。“乳包”是指顶端及周围的瘤状突起物；“钉头”是底部切断支根的痕迹；“铜皮”是指灰黄色的外皮；“铁骨”是指质地坚硬难折断；而“菊花”是形容断面的放射纹理，具此五个特点者即为三七正品。扩展资料选购三七的注意事项：1、看三七的个头。三七种植年限越长，个头就越大，质量越好。因此，三七的大小等级以每市斤有多少头(个)为准，头数越多，表明三七越小，头数越少，则三七越大。购买三七时，在经济条件允许下，应以颗大、坚实、无枝爪的为佳。2、看三七的颜色。好的三七外观为三七本色（土黄色）在加工过程中经过清洗，表面较粗糙无任何附着物。打过蜡的三七，外观多为灰白色，也有灰黑色，通常都较为光亮，有较多的附着物，这是由于三七打磨时添加了石蜡，滑石粉等物质。参考资料来源：人民网-关于三七，这些知识你知道吗？参考资料来源：百度百科-三七
6，请问铜排打孔与铜排与铜排之间的搭接有什么要求啊
铜排与铜排搭接面间隙的要求使用塞尺检查，间隙不大于125分之一毫米最主要的要求，就是接触紧密。为了实现这个要求，以下几点是必须遵守的： 1、搭接长度必须等于一个短边长度； 2、冲孔直径与紧固螺栓实现一级紧密配合，不允许电焊、气焊开孔，不允许开椭圆孔； 3、搭接面必须采用同材质，即铜与铜镀锡搭接、铜镀锡与铝材搭接、铝与铝材搭接。 4、搭接间隙检查，使用专业塞尺，间隙不大于125分之一毫米，并且最后装配时涂抹导电膏。 5、紧固螺栓的数量和规格、紧固力矩，符合《安装检验规程》的具体要求。最主要的要求，就是接触紧密。为了实现这个要求，以下几点是必须遵守的：1、搭接长度必须等于一个短边长度；2、冲孔直径与紧固螺栓实现一级紧密配合，不允许电焊、气焊开孔，不允许开椭圆孔；3、搭接面必须采用同材质，即铜与铜镀锡搭接、铜镀锡与铝材搭接、铝与铝材搭接。4、搭接间隙检查，使用专业塞尺，间隙不大于125分之一毫米，并且最后装配时涂抹导电膏。5、紧固螺栓的数量和规格、紧固力矩，符合《安装检验规程》的具体要求。最主要的要求，就是接触紧密。为了实现这个要求，以下几点是必须遵守：1、搭接长度必须等于一个短边长度。2、冲孔直径与紧固螺栓实现一级紧密配合，不允许电焊、气焊开孔，不允许开椭圆孔。3、搭接面必须采用同材质，即铜与铜镀锡搭接、铜镀锡与铝材搭接、铝与铝材搭接。4、搭接间隙检查，使用专业塞尺，间隙不大于125分之一毫米，并且最后装配时涂抹导电膏。扩展资料：打孔常用钻头：钻头是钻孔用的刀削工具，常用高速钢制造，工作部分经热处理淬硬至62～65HRC。一般钻头由柄部、颈部及工作部分组成。1、柄部：是钻头的夹持部分，起传递动力的作用，柄部有直柄和锥柄两种，直柄传递扭矩较小，一般用在直径小于12mm的钻头；锥柄可传递较大扭矩（主要是靠柄的扁尾部分），用在直径大于12mm的钻头。2、颈部：是砂轮磨削钻头时退刀用的，钻头的直径大小等一般也刻在颈部。3、工作部分：它包括导向部分和切削部分。导向部分有两条狭长、螺纹形状的刃带（棱边亦即副切削刃）和螺旋槽。棱边的作用是引导钻头和修光孔壁；两条对称螺旋槽的作用是排除切屑和输送切削液（冷却液）。切削部分结构见挂图与实物，它有两条主切屑刃和一条柄刃。两条主切屑刃之间通常为118°±2°，称为顶角。横刃的存在使锉削是轴向力增加。回答的很好 不过搭接长度你说的不对 搭接长度是根据搭接面积算出来的，不一定要大于宽度假如：2根200*10 搭接 ， 长度只需要100就够。
7，合成酮体的关键酶究竟是HMG CoA合成酶还是乙酰乙酸硫激酶 搜
HMGCoA合成酶是关键酶乙酰乙酸硫激酶存在于肾、心和脑，直接活化乙酰乙酸生成乙酰乙酰CoA，为酮体氧化中的关键酶之一。乙酰乙酰CoA硫解酶存在于酮体生成过程中，使2分子乙酰CoA缩合成乙酰乙酰CoA。乙酰乙酰CoA在HMGCOA合成酶的作用下与另一乙酰辅酶A生成HMGCOA，然后HMGCOA在其裂解酶的作用下生成乙酰乙酸，乙酰乙酸脱氢脱羧分别生成B-羟丁酸和丙酮，此为酮体生成过程。HMGCoA合成酶 在肝细胞内丰富，在其它组织极少，故而是合成关键酶。参加人卫第七版生化129页。合成酮体的关键酶是HMG CoA合成酶。酮体的生成：以乙酰CoA为原料，在肝线粒体经酶催化先缩合，后再裂解而生成体，除肝之外，肾也含有生成酮体的酮体系。酮体的合成过程可分三步进行。1、由两分子乙酰CoA在硫解酶的作用下缩合生成乙酰乙酰CoA，同时释放出一分子CoA-SH。2、乙酰乙酰CoA再与一分子乙酰CoA结合生成6个碳的3-羟甲基戊二酸单酰CoA（HMGCoA），并释放出CoA-SH，此反应是由HMGCoA合成酶催化的，该酶在肝线粒体含量极高。3、乙酰乙酸被还原生成β-羟丁酸，该还原反应是由紧密结合在线粒体内膜上的β-羟丁酸脱氢酶（此酶在肝中活性极高）催化，还原反应所需的氢由NADH提供。该反应速度取决于NADH／NAD+之比值。部分乙酰乙酸还可缓慢地自发脱羧，亦可经乙酰乙酸脱羧酶催化脱羧生成酮。 扩展资料：胆固醇和酮体的合成原料都是乙酰CoA ，2分子乙酰CoA由乙酰乙酰CoA硫解酶催化，生成乙酰乙酰CoA。后者在HMG CoA 合酶作用下生成HMG CoA（羟甲基戊二单酰CoA）。HMG CoA在HMG CoA裂解酶催化下经多步反应生成酮体。HMG CoA在HMG 还原酶催化下经多步反应生成胆固醇。可见HMG CoA合酶既参与酮体的合成，也参与胆固醇的合成。酮体的利用：酮体被氧化的关键是乙酰乙酸被激活为乙酰乙酸辅酶A，激活的途径有两种：1、在肝外组织细胞的线粒体内，β－羟丁酸经β－羟丁酸脱氢酶作用，被氧化生成乙酰乙酸，乙酰乙酸与琥珀酰CoA在β－酮脂酰CoA转移酶（β-ketoacyl CoA transferase）（3-氧酰CoA转移酶），即琥珀酰CoA；乙酰乙酸辅酶A转移酶催化下，生成乙酰乙酰CoA，同时放出琥珀酸。2、另一途径是在有HSCoA和ATP存在时，由乙酰乙酸硫激酶催化，使乙酰乙酸形成乙酰乙酰辅酶A，后者再经硫解生成两分子乙酰CoA。乙酰CoA进入三羧酸循环被彻底氧化。参考资料来源：百度百科-酮体参考资料来源：百度百科-脂代谢你好！是甲羟戊二酰COA合成酶，也就是HMGCOA合成酶，两个乙酰辅酶A在乙酰乙酸硫激酶的作用下生产乙酰乙酰辅酶A，后者在HMGCOA合成酶的作用下与另一乙酰辅酶A生成HMGCOA，然后HMGCOA在其裂解酶的作用下生成乙酰乙酸，乙酰乙酸脱氢脱羧分别生成B-羟丁酸和丙酮希望对你有所帮助，望采纳。
8，血液中酒精含量200毫克大概喝了多少白酒
70度白酒约100克；60度白酒约150克；50度白酒约200克；40度白酒约300克
拓展资料：
车辆驾驶人员血液中的酒精含量大于或者等于20mg/100ml,小于80mg/100ml属于饮酒后驾车;醉酒驾车是指车辆驾驶人员血液中的酒精含量大于或者等于80mg/100ml的驾驶行为。血液中的酒精含量大于或者等于80mg/100ml为醉酒驾车。
如果发现驾驶员有饮酒嫌疑，交警可使用呼吸式酒精检测仪现场检验，由检测仪打印出结果，被检人当场签字。如被检人拒绝签字，只要有两名交警在场，检验结果便可生效。 酒后驾车扣12分，并处暂扣驾照6个月，罚款1000元至2000元.因饮酒后驾驶机动车被处罚，再次饮酒后驾驶机动车的，将处十日以下拘留，并处一千元以上二千元以下罚款，吊销驾照。
70度白酒喝二两八钱=醉酒状态
60度白酒喝三两=醉酒状态
50度白酒喝四两=醉酒状态
40度白酒喝五两=醉酒状态
10度到20度黄酒或日本清酒喝1斤=醉酒状态
12度到16度的葡萄酒喝1斤2两=醉酒状态
3度到5度的啤酒喝3瓶或6听易拉罐=醉酒状态
20mg/100ml大致相当于一杯啤酒；80mg/100ml,则相当于3两低度白酒或者2瓶啤酒；100mg/100ml,大致相当于半斤低度白酒或者3瓶啤酒。
落实到具体的白酒酒精度数，如果人体中每百毫升血液中含到100毫克酒精，不同的酒类的量化分别是：70度白酒约50克；60度白酒约75克；50度白酒约100克；40度白酒约150克，也就是一口杯的量；日本清酒约500克；红酒约600克；啤酒约3瓶或者6个易拉罐。
参考资料：搜狗百科：醉酒驾车相当于300克低度白酒。血液酒精浓度80毫克也就是100毫升则相当于150克低度白酒，而喝一瓶啤酒百毫升血液酒精含量大约为40毫克也就是50毫升。乙醇（ethanol），有机化合物，分子式C2H6O，结构简式CH3CH2OH或C2H5OH，俗称酒精，是最常见的一元醇。
拓展资料
乙醇（ethanol），有机化合物，分子式C2H6O，结构简式CH3CH2OH或C2H5OH，俗称酒精，是最常见的一元醇。
乙醇在常温常压下是一种易燃、易挥发的无色透明液体，低毒性，纯液体不可直接饮用；具有特殊香味，并略带刺激；微甘，并伴有刺激的辛辣滋味。易燃，其蒸气能与空气形成爆炸性混合物，能与水以任意比互溶。能与氯仿、乙醚、甲醇、丙酮和其他多数有机溶剂混溶，相对密度（d15.56）0.816。
乙醇的用途很广，可用乙醇制造醋酸、饮料、香精、染料、燃料等。医疗上也常用体积分数为70%~75%的乙醇作消毒剂等，在国防化工、医疗卫生、食品工业、工农业生产中都有广泛的用途。
乙醇与二甲醚（即甲醚）互为官能团异构体。
2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，含酒精饮料中的乙醇在一类致癌物清单中。
参考资料：乙醇按公式：酒后血液酒精最高含量mg/100ml：【饮酒量（ml）×酒精含量（%）×114】÷体重（公斤）喝多少酒算酒驾呢?公安部开始严查酒后驾驶以来，不少司机朋友中了招。
一、查酒驾依据的标准是：
血液中酒精含量<20mg/100ml，不构成饮酒驾车行为(不违法);
血液中酒精含量≥20mg/100ml，为酒后驾驶
血液中酒精含量≥80mg/100ml，为醉酒驾驶
这个标准相信很多朋友都知道，但具体喝多少酒就达到酒后或醉酒标准呢，是用酒精测试仪进行现场测定的，对着测试仪呼一口气，酒精含量马上就会显示出来。如果达到醉酒或酒后标准，当事人可提出异议，可以安排抽血化验血液中酒精含量，一般要第二天出结果。如果当事人从酒精测试仪没有提出异议，测试结果可作为处罚依据。 下面以常见的几种酒作一个计算，
二、到底喝多少酒算酒后：
a、几个数据： 1、酒精度 酒的品种 正常范围 取值 啤酒 3.6-4.5% 4% 白酒 38-60% 40% 黄酒 10-16% 12% 红酒 7-16% 10% 2、血液总量 正常人体的血液总量大约占到人体体重的百分之六到百分之八，这是个质量容积比。比如，一个体重六十公斤的人，他身体的血液有3600到4800ml。这里我们按65kg和7%计算，血液总量为4550ml，合45.5(100ml)。
b、计算方法： 血液中酒精含量(mg/100ml)=酒中的酒精总量(mg)/血液量(100ml)
(a)、啤酒(酒精度按4%计)
1、如果喝一杯啤酒(200ml)，约1瓶啤酒600ml的三分之一。这时酒精含量=200*0.04/45.5，结果是0.176mg/100ml，虽然不算酒后，但已经接近酒后标准了。
2、如果喝一瓶啤酒(600ml)，这时酒精含量=600*0.04/45.5，结果是0.527mg/100ml，已经是酒后了。
3、如果喝三瓶啤酒(1800ml)，这时酒精含量=1800*0.04/45.5，结果是1.58mg/100ml，已经超过醉酒标准了(80mg/100ml)。
4、啤酒最多能喝909ml，就到了醉酒标准临界值，相当600ml/瓶的啤酒1瓶半。
(b)、白酒(按40度计算)
1、如果喝1两(50ml)白酒，酒精含量=50*0.4/45.5,结果是0.44mg/100ml，已经是酒后驾驶了。
2、如果喝2两(100ml)白酒，酒精含量=100*0.4/45.5,结果是0.88mg/100ml，已经是醉酒驾驶了。
3、白酒最多能喝91ml，就到了醉酒标准临界值，相当一两八钱的白酒。
4、白酒最多能喝23ml，就到了酒后标准临界值，相当半两的白酒。 (c)、黄酒(按12度计算)
1、如果喝1两(50ml)黄酒，酒精含量=50*0.12/45.5,结果是0.13mg/100ml，接近酒后标准了。
2、如果喝2两(100ml)黄酒，酒精含量=100*0.12/45.5,结果是0.26mg/100ml，已经是酒后驾驶了。
3、如果喝1斤(500ml)黄酒，酒精含量=500*0.12/45.5,结果是1.32mg/100ml，已经是醉酒驾驶了。
4、黄酒最多能喝303ml，就到了醉酒标准临界值，相当六两的黄酒。
5、黄酒最多能喝76ml，就到了酒后标准临界值，相当一两半的黄酒。 (d)、红酒(葡萄酒)(按10度计算)
1、如果喝1两(50ml)红酒，酒精含量=50*0.1/45.5,结果是0.11mg/100ml，问题不大。
2、如果喝2两(100ml)红酒，酒精含量=100*0.1/45.5,结果是0.22mg/100ml，已经是酒后驾驶了。
3、如果喝1斤(500ml)红酒，酒精含量=500*0.1/45.5,结果是1.1mg/100ml，已经是醉酒驾驶了。
4、红酒最多能喝364ml，就到了醉酒标准临界值，相当七两的红酒。
5、红酒最多能喝91ml，就到了酒后标准临界值，相当二两的红酒。
三、简述
喝酒后血液中酒精含量与人的体重、酒的度数高低、饮酒后休息的时间有关，与个体的酒量没有任何关系。因此，不要认为你的酒量大，能喝十瓶啤酒或一斤白酒就不怕测酒精含量了。一般来说，体重大的人血液量也会增加，酒度数越高(白酒>黄酒>红酒>啤酒)，就越容易达到酒后驾驶标准。 另外，提醒大家注意：酒精在血液中分解不是很快，有可能前一天晚上喝醉了酒，第二天早上还会被测出酒驾出来。
四、汇总(各种酒的临界值)
酒后驾驶标准 醉酒驾驶标准
啤酒 230ml(约1杯半或半瓶) 920ml(一瓶半)
白酒 23ml(约半两白酒) 92ml(约2两白酒)
黄酒 76ml(约1两半) 303(约六两)
红酒 91ml(约二两) 364(七两)
以上是喝多少酒算酒驾的介绍，最后请大家切记，千万不要酒后开车。
9，三七中含哪些氨基酸成分
1988年，鲁岐等学者对三七中的氨基酸进行了分析测试，共测得16种氨基酸，其中7种为人体必必需氨基酸，总氨基酸的平均含量为7.73%。一般来说人体必须的17种氨基酸，也较为重视 氨基酸的定性测定一、氨基酸的一般显色反应本节介绍三种显色反应：茚三酮法、吲哚醌法和邻苯二甲醛法。前二种是经典的常用显色法，后一种是近年来发展起来的荧光显色法，具有灵敏度高的特点。1. 茚三酮法显色方法有下列数种：①常用法：将点有样品的层析或电泳完毕的滤纸充分除尽溶剂，用 5g/l 茚三酮无水丙酮溶液喷雾，充分吹干，置65℃烘箱中约30min（温度不宜过高，避免空气中氨，以免背景泛红色），氨基酸斑点呈紫红色。为了使各种氨基酸呈现不同颜色，可用下列方法：②用 0.4g 茚三酮，10g 酚和90g 正丁醇的混合液显色。③用 1g/l 茚三酮无水丙酮溶液显色完毕后，再用盐酸蒸汽熏1min。④用 1g 茚三酮，600ml 无水乙醇，200ml 冰醋酸及80ml2,4,6-三甲基吡啶混合液80℃染色5～10min。为了使显色稳定，可用下列方法：⑤配制含醋酸镉 2g 加蒸馏水200ml 及冰醋酸40ml 的贮存液。将上述贮存液加200ml丙酮及2g 茚三酮，即为显色液。点有样品的滤纸上浸有此显色液后，放置于盛有一小杯浓硫酸的密闭玻璃容器中，25℃，18h，或较高温度下适当缩短时间。背景色浅，氨基酸斑点也比较稳定。⑥用含 2g/lcocl2(或cuso4)的4g/l 茚三酮异丙酮溶液显色时，氨基酸斑点呈红色，也可在茚三酮显色后喷以含钴、镉或铜等无机离子的异丙醇溶液，斑点自蓝紫色变成红色。2．吲哚醌法（1）原理各种氨基酸与吲哚醌试剂能显示不同颜色，因此可借此辩认氨基酸。氨对吲哚醌显色没有妨碍，但其灵敏度较茚三酮法稍差，显色不稳定，颜色只有在绝对干燥的环境中才能保存。（2）试剂①显色剂：1g 吲哚醌溶于100ml 乙醇及10ml 冰醋酸中（若冰醋酸用量减少则灵敏度稍差）。②底色褪色剂：在 100ml 200g/l 碳酸钠溶液中加入60g 硅酸钠（na2sio3?9h2o）在水浴（60～70℃）中加热搅拌直至完全溶解，待溶液比较清澈为止。在溶解过程中，有时硅酸钠会结成凝胶，此时只需继续搅拌即可溶解。配制时若硅酸钠用量多则褪色较快，但背景容易变黄，硅酸钠用得少（40g），虽裉色较慢，但背景较为洁白。显色步骤层析或电泳后滤纸烘干后，仔细喷上或涂上显色剂，用电吹风迅速吹干，待醋酸气味不太刺鼻时移置100℃烘箱烘5～15min，直至显色为止（温度不要太高，以免引起减色）注意观察所显出的颜色，然后均匀地涂上底色褪色剂，纸的背景即由黄色变为绛红而后逐渐变浅，待黄色背景几乎褪尽时，迅速用电吹风吹干，并随时观察颜色的变化。例如苏氨酸在褪色前为浅红带褐色，褪色后则呈橙黄色或黄色：脯氨酸在褪色前为蓝色，吹干时很快褪成无色。室温较低时，底色褪色很慢，此时可将褪色剂加温到30～40℃。温度过高也不宜，因氨基酸斑点的褪色速度也同时加快，应该避免。其他显色步骤：显色剂为 1g 吲哚醌，1.3g 醋酸锌溶解于70～80ml 热异丙醇中，冷却后加1ml 吡啶。或者1g 吲哚醌，1.5g 醋酸锌溶解于95ml 热异丙醇中，加3ml 水，冷却后加1ml 冰醋酸。点有样品的滤纸仔细喷以显色剂后，80～85℃放置10min，背景可用水迅速浸洗去而不使氨基酸斑点退去由于吲哚醌试剂配制方法不同，对同一种氨基酸所显颜色往往也有差异。3．邻苯二甲醛法邻苯二甲醛法是目前纸上层析、硅胶薄层层析荧光显色氨基酸最灵敏的方法之一，也可用于氨基酸溶液定量，并推广应用于乙内酰苯硫脲氨基酸、多肽和蛋白质的检出和定量。根据文献报道，氨基酸纸上层析灵敏度达0.5μmol，在硅胶薄层层析上为0.05～0.2μmol。这里介绍在纸上层析显现氨基酸方法。（荧光胺是另一种常用的荧光试剂，由于荧光胺来源比较困难，这里未作介绍）（1）原理邻苯二甲醛在 2-巯基乙醇存在下，在碱性溶液中与氨基酸作用产生荧光化合物，最适的激发光和发射光波长分别为340nm 和455nm。各种氨基酸显现的荧光强度不同，其相对荧光强度由大到小大致顺序如下：天门冬氨酸，异亮氨酸，甲硫氨酸，精氨酸，组氨酸，亮氨酸，丝氨酸，缬氨酸，谷氨酸，苏氨酸，甘氨酸，色氨酸，丙氨酸，苯丙氨酸，赖氨酸，酪氨酸，nh3，脯氨酸和半胱氨酸。（2）试剂邻苯二甲醛显色液：取0.1g 邻苯二甲醛，0.1mg 巯基乙醇，1ml 三乙胺，加丙酮+石油醚（60℃～90℃）（1+1）的混合溶剂至100ml。放置0.5h 后使用。显色步骤将含有氨基酸样品的滤纸浸入邻苯二甲醛显色液中 1min，冷风吹干，在温度18℃以下，湿度50%～90%之间显色0.5h，于紫外灯下观察荧光点。说明在滤纸上显现氨基酸时，邻苯二甲醛浓度以 0.1%为宜。显色时必须有一定的湿度，以便氨基酸溶解，提高分子碰撞机率，并使极性基团解离，促进反应趋于完全。湿度太低，显不出荧光。温度对显现的荧光延时有显著影响，温度高荧光延时短，温度低荧光延时长。二、个别氨基酸的显色反应利用个别氨基酸与某些试剂具有特殊的显色反应定性氨基酸。可应用于纸层析和纸电泳显色，也可单独应用。方法很多，仅将常用的方法介绍如下：1．精氨酸的显色——坂口（sakaguchi）反应(1)第一种方法试剂：①5g 尿素溶解于100ml0.1g/lα-萘酚乙醇中。使用前，每100ml 加约5g koh。②0.7ml 溴水溶解于100ml 5%naoh 中。显色步骤：在点有样品的滤纸上喷试剂①后，在空气中吹几分种，再喷试剂②。精氨酸或含精氨酸的多肽显红色。此试剂对含精氨酸的蛋白质也适用。(2)第二种方法：试剂：①1g/l 8-羟基喹啉的丙酮溶液。②0.02ml 溴水溶解于100ml 0.5mol/lnaoh 溶液中。显色步骤：将点有样品的滤纸烘干后，喷上试剂①，吹干后，再喷试剂②。精氨酸或其他胍类物质显桔红色。2．胱氨酸和半胱氨酸的显色试剂：①1.5g 亚硝基铁氰化钠（na2fe(cn)5no2?5h2o）溶于5ml 2mol/l h2so 4 溶液中，加95ml 甲醇。此时会有沉淀产生，可保存一个月以上。使用时在每100ml 上述溶液中加10ml 28%氨水，过滤除去沉淀，清液仅能保持一天左右。②2g 氰化钠溶于5ml 水中，然后加95ml 甲醇。此时有沉淀产生，使用时只需摇匀即可。显色步骤：半胱氨酸的显色：在滤纸上喷以试剂①的清液，5min 后半胱氨酸显红色。胱氨酸的显色：先将滤纸浸入试剂②，迅速取出，稍等片刻再喷试剂甲的清液，5min 后胱氨酸显红色。也可以把试剂②配制的浓度增加一倍，在显色前混和，再喷到滤纸上。3．甘氨酸的显色试剂；0.1g 邻苯二甲醛溶于100ml 77%乙醇中。显色步骤：点有样品的滤纸喷上试剂，甘氨酸显墨绿色，在汞灯（365nm）下显巧克力棕色。吲哚醌显色后，再用此试剂仍有效。以甘氨酸为n 端的小肽也能显色，但其n 端被保护后，以及其他氨基酸均不显色。4．脯氨酸的显色试剂：1g 吲哚醌和1.5g 醋酸锌，1ml 醋酸，5ml 蒸馏水混和，再加入95ml 异丙醇。新鲜配制。显色步骤：层析滤纸除尽溶剂，喷上以上试剂，80℃～85℃烘箱内放置30min，脯氨酸显蓝色，再以30℃温水漂洗除去多余的试剂后，背景为白色或浅黄色。也可剪下脯氨酸斑点，在试管中加入5ml 水饱和酚，在黑暗中洗脱15min，间歇振摇，于610nm 测定其吸光度。从已知标准曲线即可求得样品内脯氨酸含量，测定范围5～20μg。5．丝氨酸和羟赖氨酸的显色试剂：①0.035mol/l 过碘酸钠（748mgnaio4 溶于数毫升甲醇中，加2 滴6mol/l 盐酸，再用甲醇稀释至100ml）。②15g 醋酸铵加0.3ml 冰醋酸，加1ml 乙酰丙酮，用甲醇稀释到100ml。显色步骤：点有样品的滤纸吹干，先喷试剂①，近干后再喷试剂②，室温放置 2h，紫外灯下照射0.5h，丝氨酸和羟赖氨酸呈黄色斑点，在紫外线下都有荧光。6．羟脯氨酸的显色试剂：①1g 吲哚醌溶于100ml 乙醇及10ml 冰醋酸。②1g 对二甲胺苯甲醛溶于100ml的丙酮浓盐酸（9＋1）混合液中。（此试剂不稳定，隔数日后溶液颜色增深发黑，灵敏度降低，故用时新鲜少量配制。显色步骤：将待鉴定的溶液点于小方块纸上，干后先点上试剂①，热风吹干。这时纯羟脯氨酸呈墨绿色，纯脯氨酸呈深蓝色（极灵敏），对其他氨基酸呈程度不同的紫红色（不太灵敏）；然后再点上试剂②吹干，如溶液中含有羟脯氨酸即转变为玫瑰红色，而其他氨基酸与吲哚醌所生成的颜色则褪去。7．色氨酸的显色(1)第一种方法试剂：1g 对二甲氨基苯甲醛加90ml 丙酮，10ml 浓盐酸。新鲜配制。显色步骤：点有样品的滤纸干燥后，喷上以上试剂，在室温下放置几分钟后，色氨酸显蓝色或紫红色。茚三酮显色后，仍可使用本法。(2)第二种方法：试剂：10ml 35%甲醛加10ml25%盐酸，20ml 无水乙醇。显色步骤：点有样品的滤纸喷上以上试剂后，100℃烘5min，色氨酸在长波长紫外光下呈现荧光（黄-橙-带绿色）。8．酪氨酸的显色试剂：①0.1%α-亚硝基β-萘酚的95%乙醇溶液。②10%硝酸水溶液。显色步骤：点有样品的滤纸喷上试剂①后，吹干，再喷试剂②，然后在100℃烘3min，酪氨酸或含酪氨酸的多肽在浅灰绿色的背景上显红色，0.5h 后转变为桔红色，其后渐退去。灵敏度1～2μg 酪氨酸。茚三酮显色后，再用此试剂处理，仍能显色，茚三酮所显出的紫红色斑点变成红色。9．酪氨酸和组氨酸的显色——pauly 反应试剂：①4.5g 对氨基苯磺酸与45ml 12mol/l 盐酸共热溶解，以蒸馏水稀释至500ml。用时取出30ml，在0℃与等体积的5%亚硝酸钠水溶液相混合。（室温放置太长会失效）②10%碳酸钠水溶液。显色步骤：点有样品的滤纸上喷试剂①，片刻后再喷试剂②。组氨酸及含组氨酸的多肽显桔红色；酪氨酸及含酪氨酸的多肽显浅红色。第六节 氨基酸定量测定一、氨基酸的一般定量测定（一）甲醛滴定法1．原理氨基酸具有酸性的-cooh 基和碱性的-nh2 基。它们相互作用而使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液时，-nh2 基与甲醛结合，从而使其碱性消失。这样就可以用标准强碱溶液来滴定-cooh 基，并用间接的方法测定氨基酸总量。反应式（有三种不同的推论）如下：2．方法特点及应用此法简单易行、快速方便，与亚硝酸氮气容量法分析结果相近。在发酵工业中常用此法测定发酵液中氨基氮含量的变化，来了解可被微生物利用的氮源的量及利用情况，并以此作为控制发酵生产的指标之一。脯氨酸与甲醛作用时产生不稳定的化合物，使结果偏低；酪氨酸含有酚羧基，滴定时也会消耗一些碱而致使结果偏高；溶液中若有铵存在也可与甲醛反应，往往使结果偏高。3．操作方法吸取含氨基酸约 20mg 的样品溶液于100ml 容量瓶中，加水至标线，混匀后吸取20.0ml置于200ml 烧杯中，加水60ml，开动磁力搅拌器，用0.05mol/l 氢氧化钠标准溶液滴定至酸度计指示ph8.2，记录消耗氢氧化钠标准溶液ml 数，供计算总酸含量。加入10.0ml 甲醛溶液，混匀。再用上述氢氧化钠标准溶液继续滴定至ph9.2，记录消耗氢氧化钠标准溶液毫升数。同时取 80ml 蒸馏水置于另一200ml 洁净烧瓶中，先用氢氧化钠标准溶液调至ph8．2，（此时不计碱消耗量），再加入10.0ml 中性甲醛溶液，用0.05mol/l 氢氧化钠标准溶液滴定至ph9.2，作为试剂空白试验。4．结果计算氨基酸态氮质量分数（%）=式中：v1——样品稀释液在加入甲醛后滴定至终点（ph9.2）所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml；v2——空白试验加入甲醛后滴定至终点所消耗的氢氧化钠标准溶液的体积，ml；c——氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/l；m——测定用样品溶液相当于样品的质量，g；0.014——氮的毫摩尔质量，g/mmol。5．说明①本法准确快速，可用于各类样品游离氨基酸含量测定。②浑浊和色深样液可不经处理而直接测定。(二)茚三酮比色法1．原理氨基酸在碱性溶液中能与茚三酮作用，生成蓝紫色化合物（除脯氨酸外均有此反应），可用吸光光度法测定。该蓝紫色化合物的颜色深浅与氨基酸含量成正比，其最大吸收波长为 570nm，故据此可以测定样品中氨基酸含量。2．操作方法(1)标准曲线绘制准确吸取 200μg /ml 的氨基酸标准溶液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml（相当于0、100、200、300、400、500、600μg 氨基酸），分别置于25ml 容量瓶或比色管中，各加水补充至容积为4.0ml，然后加入茚三酮溶液（20g/l）和磷酸盐缓冲溶液（ph 为8.04）各1ml，混合均匀，于水浴上加热15min，取出迅速冷至室温，加水至标线，摇匀。静置15min后，在570nm 波长下，以试剂空白为参比液测定其余各溶液的吸光度a。以氨基酸的微克数为横坐标，吸光度a 为纵坐标，绘制标准曲线。(2)样品测定吸取澄清的样品溶液 1～4ml，按标准曲线制作步骤，在相同条件下测定吸光度a 值，用测得的a 值在标准曲线上可查得对应的氨基酸微克数。3．结果计算氨基酸含量（mg/100g）=式中：c——从标准曲线上查得的氨基酸的质量数，μg；m——测定的样品溶液相当于样品的质量，g。4．说明及注意事项①通常采用的样品处理方法为：准确称取粉碎样品 5～10g 或吸取样液样品5～10ml，置于烧杯中，加入50ml 蒸馏水和5g 左右活性炭，加热煮沸，过滤，用30～40ml 热水洗涤活性炭，收集滤液于100ml 容量瓶中，加水至标线，摇匀备测。②茚三酮受阳光、空气、温度、湿度等影响而被氧化呈淡红色或深红色，使用前须进行纯化，具体操作可参阅黄伟坤等编著《食品检验与分析》。(三)非水溶液滴定法1．原理氨基酸的非水溶液滴定法是氨基酸在冰醋酸中用高氯酸的标准溶液滴定其含量。根据酸碱的质子学说：一切能给出质子的物质为酸，能接受质子的物质为碱；弱碱在酸性溶剂中碱性显得更强，而弱酸在碱性溶剂中酸性显得更强，因此本来在水溶液中不能滴定的弱碱或弱酸，如果选择适当的溶剂使其强度增加，则可以顺利地滴定。氨基酸有氨基和羧基，在水中呈现中性，而在冰醋酸中就能接受质子显示出碱性，因此可以用高氯酸等强酸进行滴定。本法适合于氨基酸成品的含量测定。允许测定的范围是几十毫克的氨基酸2．测定(1)直接法（适用于能溶解于冰醋酸的氨基酸）：精确称取氨基酸样品50mg 左右，溶解于20ml 冰醋酸中，加2 滴甲基紫指示剂，用0.100mol/l 高氯酸标准液滴定（用10ml 体积的微量滴定管），终点为紫色刚消失，呈现蓝色。空白管为不含氨基酸的冰醋酸液，滴定至同样终点颜色。(2)回滴法（适用于不易溶解于冰醋酸而能溶解于高氯酸的氨基酸）：精确称取氨基酸样品30～40mg 左右，溶解于5ml0.1mol/l 高氯酸标准溶液中，加2 滴甲基紫指示剂，剩余的酸以醋酸钠溶液滴定，颜色变化由黄，经过绿、蓝至初次出现不褪的紫色为终点。3．说明(1)能溶解于冰醋酸的氨基酸，可以用直接法测定的有：丙氨酸、精氨酸、甘氨酸、组氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸和苏氨酸。不易溶解于冰醋酸，但能溶解于高氯酸可以回滴法测定的有：赖氨酸、丝氨酸、胱氨酸和半胱氨酸。(2)谷氨酸和天冬氨酸在高氯酸溶液中也不能溶解，可以将样品溶解于2ml 甲酸中，再加20ml 冰醋酸，直接用标准的高氯酸溶液滴定。(四)邻苯二甲醛法(opt 法)1．原理邻苯二甲醛在 2-巯基乙醇存在下，于碱性溶液中与氨基酸作用产生荧光化合物，最适的激发光和发射光波长分别为340 和455nm。可能产物为：各种氨基酸显现的荧光强度不同，其相对荧光强度由大到小大致顺序如下：天门冬氨酸，异亮氨酸，甲硫氨酸，精氨酸，组氨酸，亮氨酸，丝氨酸，缬氨酸，谷氨酸，苏氨酸，甘氨酸，色氨酸，丙氨酸，苯丙氨酸，赖氨酸，酪氨酸，nh3，脯氨酸，和半胱氨酸。本法可用于测定游离氨基酸的含量。灵敏度较茚三酮法约高 100 倍以上，可测到0.1～1×10－4mol 氨基酸。如用于血清中α-氨基氮的测定，每次血清用量只需5～10μl。与另一种荧光试剂（萤光胺）一样，空白无荧光，只有与氨基酸结合才产生荧光。缺点是与脯氨酸不产生荧光，邻苯二甲醛与半胱氨酸荧光值太低。荧光胺已有用于氨基酸自动分析定量分析，但由于试剂昂贵及个别氨基酸反应不满意，目前还未普遍应用。(五)三硝基苯磺酸法三硝基苯磺酸（tnbs）是定量测定氨基酸的重要试剂之一。tnbs 在偏碱性的条件下与氨基酸反应，先形成中间络合物，如下式所示：中间络合物在光谱上有二个吸收值相近的高峰，分别位于355nm 和420nm 附近。然而溶液一旦酸化，中间络合物转化成三硝基苯-氨基酸（tnp-氨基酸），420nm 处的吸收值显著下降，而350nm 附近的吸收峰则移至340nm 处。利用 tnbs 与氨基酸反应的这一特性，可在420nm 处（偏碱性溶液中）或在340nm（偏酸性溶液中）对氨基酸进行定量测定。下表列出各种氨基酸与tnbs 反应后在不同条件下测定的吸光度。在340nm 处，各氨基酸的吸收度大致相近，而在420nm 处的吸光度因氨基酸种类而异；在加入适量so32－时，吸收值升高。本法允许的测定范围是 0.05～0.4μmol 氨基酸。表 10-3 各种氨基酸与tnbs 反应后在不同条件下测定的吸光度氨基酸种类 碱性溶液① 酸性溶液加 so3①取不同含量氨基酸液1ml，加4%nahco3 1ml，0.1%tnbs 1ml，于40℃反应2h，用水补充至4ml，在420nm 处测定。制作氨基酸浓度—吸光度坐标图，从曲线中求得各氨基酸于1μmol 时的吸光度。②条件同上，但在与tnbs 反应时加0.01mol/l na2so3 1ml，最后总体积也是4ml，同样在420nm 处测定。③条件同①，但与 tnbs 反应后加1mol/l hcl 1ml 酸化，在340nm 处测定。(六)乙酰丙酮和甲醛荧光法1．原理氨基酸与乙酰丙酮和甲醛反应，生成 n-取代基2,6-二甲基-3,5-二乙酰基1,4-二氢吡啶，产生黄-绿色荧光，可用荧光分析法检测。主要反应如下：乙酰丙酮 甲醛 氨基酸 荧光物质2．试剂混合试剂：取1mol/l 乙酸钠溶液10ml，加入乙酰丙酮溶液0.4ml 和30%甲醛溶液1ml，用水稀释至30ml。3．测定取氨基酸液 1ml，加入混合试剂1ml，用棉花塞满试管口，避光于100℃下加热10min，冷却，加水2ml，然后测定荧光值。表 10-4 各种氨基酸的发射波长和检测范围化合物（激发波长405nm） 发射波长（nm） 检测范围（mg/l）甘氨酸 485 2～10苯丙氨酸 490 8～40丝氨酸 485 5～25半胱氨酸（盐酸盐） 500 20～100谷氨酸 485 20～100与标准相比较求出样品中的氨基酸含量。二、个别氨基酸的定量测定（一）赖氨酸的测定1．原理用铜离子阻碍游离氨基酸的α-氨基,使赖氨酸的ε-氨基可以自由地与1-氟-2,4 二硝基苯(fdnb)反应,生成ε-dnp-赖氨酸。经酸化和用二乙基醚提取,在波长390nm 处有吸收峰,从而求出样品中游离赖氨酸的含量.2．试剂(1)氯化铜液：称28.0g 无水氯化铜，用水稀释至1000ml。(2)磷酸三钠溶液：称68.5g 无水磷酸钠,用水稀释至1000ml。(3)硼酸盐缓冲液（ph9.1～9.2）：称54.64g 带有10 结晶水的四硼酸钠，用水稀释至1000ml 。(4)磷酸铜悬浮液：搅拌情况下，把氯化铜液200ml，缓慢倒入400 ml 的磷酸三钠溶液中，把悬浮液以2000r/min 速度离心5min ，用硼酸盐缓冲液再悬浮沉淀物，洗涤离心3 次，把最后的沉淀物悬浮在硼酸盐缓冲液中，并用缓冲液稀释至1l。(5)1-氟-2，4 二硝基苯(fdnb)溶液：吸取fdnb10ml 用甲醇稀释至100ml。(6)赖氨酸-hcl 标准溶液：称取一定量赖氨酸-hcl，用水配成200mg/l 的工作标准液。(7)100g/l 丙氨酸溶液。3．测定(1)称取通过40 目筛的均匀试样1.00g，置于100ml 烧瓶中。另吸取赖氨酸-hcl 标准工作液5ml（相当1mg 赖氨酸-hcl），连同试剂空白同时进行试验。(2)向各烧瓶中加入25ml 磷酸铜悬浮液，然后再加10%丙氨酸1.0ml,振摇15min。吸取10%fdnb 溶液0.5ml.置于各处理烧瓶中,将烧瓶置沸水中加热15min。(3)取出烧瓶,立即加入1mol/lhcl 溶液25ml,并不断摇动使之酸化和分散均匀。(4)烧瓶中的溶液冷却至室温,用水稀释至100ml.取约40ml 悬浮液进行离心。(5)用25ml 二乙基醚提取上清液3 次，除去醚。并将溶液收集于有刻度试管中,于65℃水浴中加热15min，以除去残留的醚。并记录溶液的毫升数。(6)吸取上述各处理液10ml，分别与95%乙醇溶液10ml 混合，用滤纸过滤。(7)用试剂空白液凋零，测定样液a390nm，与赖氨酸-hcl 标准液对照，求出样品中赖氨酸-hcl 的含量。本法在 0～40mg/l 赖氨酸溶液范围内呈良好线性关系。4．说明(1)添加一定量的中性氨基酸如丙氨酸，增加总氨基酸的浓度，有助于赖氨酸-hcl 浓度具有良好的线性关系。(2)用醚提取酸性溶液，可将所有中性或酸性的dnp-氨基酸衍生物除去，并把fdwb的产物破坏，否则这些产物在390nm 处存在干扰。（二）色氨酸的测定1.原理样品中的蛋白质经碱水解后，游离的色氨酸与甲醛和含铁离子的三氯乙酸溶液作用，生成哈尔满化合物（norharman），具有特征荧光值，可以进行定量测定。2．试剂(1)0.3mmol/l 三氯化铁-三氯乙酸溶液：称取三氯化铁(fecl3?6h2o)41mg，加入10%三氯乙酸溶液溶解并定溶至500ml。(2)2%甲醛：量取甲醛溶液(36%～38%)5.5ml，加水至100ml。(3)色氨酸标准溶液：称取10mg 色氨酸，用0.1mol/lnaoh 溶液溶解并定容至100ml,置棕色瓶中备用,使用时用水稀释成1mg/l 的标准溶液.3．测定称取样品粉末 100～200mg 于离心管中，加入4ml 乙醚,摇匀后过夜，以3000r/min 速度离心。将乙醚提取液移入试管内,并用乙醚洗涤残渣3 次，收集乙醚液于试管中，于40℃水浴除去醚。残留物中加入6.25mol/l n aoh 4ml，火焰封口，于110℃水解16～24h。水解液用4mol/l hcl 溶液调节至ph6～8 后,用水定容至50ml,过滤备用。吸取滤液 0.2ml，加入2%甲醛0.2ml 和0.3mmol/l 三氯化铁-三氯乙酸混合液2ml，摇匀后于100℃水浴中加热1h，取出，冷却后用水定容至10ml。在激发波长为365nm，发射波长449nm 条件下，测定样品的荧光强度，与色氨酸标样作对照，求出样品中色氨酸含量。本法在 0～10mg/l 色氨酸溶液范围内呈良好线性关系。
